Полежаева О.А., Головко Е.Н.д.б.н., Забашта Н.Н., д.с.-х.н.

ГНУ СКНИИЖ Россельхозакадемии, Российская Федерация, г. Краснодар

Polezhaeva O.A., Golovko E.N., Dr. Sci. Biol., Zabashta N.N., Cand. Sci. Vet.

State Scientific Institution North-Caucasus Research Institute of Animal Husbandry of Russian Academy of Agricultural Sciences, Krasnodar, Russia

Аннотация: в условиях молочной фермы ПЗ «Дружба» Калининского района Краснодарского края проведен опыт с целью определения в рационе дойных коров минимального количества афлатоксина В₁, при котором наблюдается выделение его метаболита М₁ с молоком и скорости его выведения из организма. Опыт проведен методом групп-периодов на двух группах коров (по три головы в группе, со средней живой массой 500 кг).

Ключевые слова: коровы; молоко; микроскопические грибы; афлатоксин В₁; М₁; накопление в тканях; выведение; адсорбенты

Summary: an experiment has been conducted on the dairy farm "Druzhba" in Kalinin district of Krasnodar region to determine a minimum amount of aflatoxin B1 in the diet of dairy cows, when there is the excretion of its metabolite M1 with milk. The experiment was conducted with a groups-periods method on two groups of cows (three heads in the group, with an average live weight of 500 kg).

Key words: cows; milk; microscopic fungi; aflatoxin B1; M1; accumulation in the tissues; excretion; adsorbents

К токсическим веществам природного происхождения относятся микотоксины – вторичные метаболиты плесневых микроскопических грибов, из которых наиболее широким спектром отрицательного воздействия на организм животных и человека обладают афлатоксины [2]. Они оказывают ярко выраженное гепатоксическое и  гепатоканцерогенное  действие и могут попадать в организм человека через систему  пищевой цепи с молоком и мясом животных, потреблявших загрязнённый микотоксинами корм [1].

Поэтому проблема разработки действенных мер предупреждения контаминации продовольственного сырья и пищевых продуктов микотоксинами и, в частности, афлатоксином В₁ и его метаболитом М₁, представляющим наибольшую опасность для здоровья человека, является жизненно важным и актуальным.

Методика. Афлатоксин В₁ был получен в лаборатории микробиологии ГНУ СКНИИЖ путём культивирования токсикогенных штаммов микроскопических грибов рода  Aspergillus parasiticus NRLL 2999. Для этого в специально подготовленную среду, основой которого является автоклавированный рис, вносили споры указанных грибов и помещали в термостат на 21 день при температуре 25-30^оС.

Экстракцию образовавшихся афлатоксинов производили хлороформом, который затем отфильтровывали и упаривали.

Выделение афлатоксина В₁ из смеси других, менее опасных, видов афлатоксинов (В₂ , G₁ , G₂) производили на хроматографической колонке [3,4].

После экстракции хлороформом в полученной фракции определялась концентрация афлатоксина В₁ методом ВЭЖХ и тонкослойной хроматографии и в необходимом количестве В₁ вносили в корм (дерть) путём разбрызгивания хлороформного экстракта. Хлороформ удаляли при постоянном помешивании и вентилировании. При этом не допускалось попадания прямых солнечных лучей.

С целью установления количества и скорости выделяемого с молоком метаболита М₁ в зависимости от различных концентраций искусственно введённого афлатоксина В₁ в концентрированные корма рациона был проведён опыт на дойных коровах на 2 группах коров по 3 головы со средней живой массой 500 кг, методом групп-периодов.

Коров обеих групп содержали в отдельных станках. Концентрированные корма с афлатоксином В₁ раздавали 2 раза в сутки, поение осуществляли из автопоилок.

Во время уравнительного и промежуточного периодов коровы обеих групп находились в одинаковых условиях кормления и содержания.

В учётный период  коров кормили в соответствии со схемой (табл.1).

Таблица 1. Схема опыта (n=3)

В качестве основного рациона (ОР) коровы получали рацион, полноценный по питательным веществам (табл. 2).

Корма с афлатоксином В₁ задавали 2 дня, после чего собирали молоко через 24, 48, 72 и 96 часов от последней дачи токсина. При этом  учитывали молочную продуктивность. Часть молока лиофилизировали и определяли содержание вторичного метаболита – афлатоксина М₁.

С целью установления влияния афлатоксина В₁ на состояние здоровья животных у них в конце подготовительного и учётного периодов брали кровь и анализировали на содержание эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобина, АСТ, АЛТ по общепринятым методикам.

Таблица 2. Состав основного рациона

Результаты исследований и их обсуждение. В настоящих исследованиях установлено, что минимальное количество афлатоксина В₁ в рационе, вызывающее появление его метаболита М₁ в молоке – 2 мг/гол/сутки (табл. 3.)

Таблица 3. Выведение афлатоксина М₁ с молоком при различном содержании В₁ в рационе

Афлатоксин М₁ появлялся в молоке через 24 часа и выделялся на протяжении 72 часов. Максимальное количество его выводилось на третьи сутки. Введение афлатоксина В₁ в рацион в указанных дозах не оказывало влияния на состояние здоровья животных, показатели крови, рубцовое пищеварение (pH, концентрацию аммиака, летучих жирных кислот). и молочную продуктивность (таблица 4).

Таблица 4. Показатели исследования крови опытных коров

Выводы.

1.Минимальное количество афлатоксина В₁ в опытном рационе, вызвавшее появление вторичного метаболита, афлатоксина М₁ в молоке коров составило 2 мг В₁/гол/сутки.

2. Афлатоксин М₁ появился в молоке опытных коров через 24 часа после скармливания рациона, содержащего афлатоксин В₁ и выделялся на протяжении 72 часов. Максимальное количество его выделилось на третьи сутки.

Список литературы

1. Головко, Е.Н. Улучшение качества кормовых средств – путь к экологизации свиноводства и получению безопасных продуктов питания / Е.Н.Головко, Т.К.Кузнецова, А.Ф.Глазов // Материалы Международной научно-производственной конференции “Скороспелость с.-х. животных и пути её совершенствования”, Краснодар, 2003, - 37-39 с.

2. Тутельян, В.А., Кравченко, Л.В.- Микотоксины (Медицинские и биологические аспекты)/ АМН СССР. - М., Медицина, 1985. - 320 с.

3. Rusul G. Food additives and plant components control growth and aflatoxin production by toxigenic aspergilli:  A review. J. Mycopathologia./ G. Rusul, E.Marth // -V.101.- 1988.-P.13-23.

4. Verma, R. J. Aflatoxin causes DNA damage. / R. J. Verma, // Int. J. Hum. Genet. 4: 2004., 231–236.